Regeneração in vitro de bulbilhos usando explantes de duas e quatro escamas de floco-de-neve-de-verão (Leucojum aestivum L.)

Resumo

Leucojum aestivum é uma espécie valiosa e ameaçada de extinção com escamas de bulbo mais adequadas como explantes em mi- cropropagação. No presente estudo, a micropropagação foi investigada utilizando dois explantes diferentes e várias concentrações e combinações de reguladores de crescimento de plantas (RCPs). Os bulbos foram primeiro desinfetados com benomyl® por 5 horas. Após atender aos requisitos de resfriamento, explantes de duas e quatro escalas foram fornecidos para organogênese direta e indi- reta. Os explantes foram expostos a água quente, etanol 70% e hipoclorito de sódio 2,5% para posterior desinfestação. Explantes de quatro escalas foram tratados com diferentes concentrações e combinações de ácido naftalenoacético (NAA), 6-benziladenina (BA) e cinetina (Kin) para a regeneração dos bulbilhos. Para calogênese, foram aplicados 0,5 mg L^-1 de BA combinado com 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 mg L^-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D). Em relação aos explantes de duas escalas, diferentes combinações e concentrações de BA, ácido indol-3-butírico (IBA) e NAA foram usadas para indução de bulbilhos, e várias combinações de ácido indolacético (IAA), NAA, 2, 4-D e BA foram usados para indução de calo. Nenhum dos explantes em duas escalas respondeu à regeneração bulbilhos e aos meios de indução de calo. Ao contrário, explantes em quatro escalas regeneraram bulbilhos e raízes no meio de controle e meio MS enriquecido com diferentes RCPs. Calos foram gerados em meio MS suplementado com 2,4-D e BA, e regeneração indireta foi observada em alguns casos. No meio de controle, as raízes regeneradas tinham uma forma natural, mas em meio rico em RCPs, eram deformadas. Com relação à porcentagem de regeneração, número e comprimento de bulbilhos e comprimento de raiz, não foram encontradas diferenças significativas entre o controle e o melhor tratamento PGR em cada caso. Portanto, parece lógico sugerir a não utilização de RCPs, o que reduzirá consideravelmente os custos de produção em larga escala.