Indução in vitro de calos e identificação de variação de DNA em Etlingera elatior usando marcadores de sequências simples repetidas (ISSR)

Resumo

Etlingera elatior é uma espécie ornamental promissora para a horticultura, com vários propósitos, tais como medicamentos, agentes antibacterianos, culinários e ornamentais. O aumento da demanda por mais variedades levou a melhorias da E. elatior por meio da tecnologia de cultura de tecidos. A variação somaclonal ajuda a superar a falta de variedades desta espécie, devido à propagação assexual. Os objetivos deste estudo foram induzir calos e brotos e detectar variações genéticas usando marcadores ISSR. Os resultados mostraram que o meio basal Murashige & Skoog (MS) suplementado com glicose e 1,5 mg L-1 de 6-benzilaminopurina (BAP) e 3 mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) produziu uma percentagem de calos significativamente maior, 50% após 20 semanas de cultura. Em seguida, os calos friáveis foram transferidos para meios de indução de brotos com diferentes concentrações de BAP,  ácido 1-naphthaleneáctico (NAA) e thidiazuron (TDZ). Após 12 semanas em meios de indução de brotos,  uma estrutura semelhante a raiz foi observada em massas de calos T11 (0,1 mg L-1 NAA e 0,3 mg L-1 TDZ). As variações genéticas dos calos foram avaliadas com base em sete primers ISSR. Setenta e duas bandas foram geradas, das quais 51 foram polimórficas, com a percentagem média de bandas polimórficas de 72%. O coeficiente de Jaccard de valores de semelhança registrados entre 0,3529 e 0,4762 mostrou o nível de variação genética entre os calos. Em resumo, os explantes foram afetados por várias concentrações de auxina e citocinina para indução de calos. Os marcadors ISSR revelaram a ocorrência de variações genéticas durante os processos de indução de calos e brotos, sugerindo um potencial para gerar novas variantes utilizando cultura de tecidos.